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意外频发

今天下午到达的样本并不多,只是有5管血液需要提取游离dna。今天血液提取归别人管,杨帆只管把文库建好过夜杂交上即可。

文库已经在pcr仪器上做到末端修复加a了,接下来再做纯化丶扩增和分选,差不多要2个小时左右,就可以质控後杂交了。杨帆默默的在旁边实验室做实验,等待时间就默默的躲到门後面猫腰玩手机。

突然,杨帆听到有人大发雷霆的声音,接着黄婷进来问杨帆是不是配了80%酒精。杨帆有些懵,紧张的回复说自己今天负责建库杂交,要配置乙醇。配的时候徐寿祖进来看到了,就让杨帆帮忙一起配置。自己已经配置好放传递窗里面了。

黄婷眼睛一亮,让杨帆跟她去提取屋说下情况。杨帆看了下反应时间,时间还来得及,就站起来准备跟黄婷走。

出门前,杨帆心里有些忐忑,问黄婷是出了什麽事情。黄婷一脸无奈的说,徐寿祖今天做提取,结果样本浓度都很低,都是不合格样本,组长刚才在跟他排查问题,他坚持说自己没问题,结果组长发现他用的80%乙醇味道不对,估计是浓度不对,样本大部分都洗脱走损失掉了。组长很生气,徐寿祖说今天酒精是找别人配置的,肯定是配的人出错了。

杨帆瞬间非常害怕,她说不可能啊,自己今天做实验还用乙醇呢,都挺正常的。可是,杨帆又想到,今天建库实验还没做到质控,也不知道浓度是不是正常。如果真的乙醇浓度配错了,那今天一天建库的样本也全废了。

黄婷看了眼pcr仪上的程序,一看就是还在扩增,心里也明白杨帆还没做到质控,不禁叹了一口气,提醒杨帆组长现在心情很不好,一会儿要小心。

杨帆觉得身上有些冷,心里发紧。她抿着嘴,快步的走到黄婷前面,先一步进入到提取屋。

徐寿祖看到杨帆,就嚷嚷着说杨帆配错试剂了,导致今天这批血浆游离dna浓度根本没有。组长生气的看着杨帆,问杨帆今天建库实验浓度怎麽样。

杨帆有些心虚的说,实验还没做完,还没测浓度。

组长忍不住斥责杨帆,并表示这个事情要跟红姐说明情况,让杨帆赶快再重新建库,今天不管加班到多晚,都要过夜杂交上。又安排徐寿租往剩馀血浆中补点无核酸酶水,凑够最低提取体积,再做一遍提取,用刚才得到的低浓度産物作为洗脱液,一会把柱子上的産物洗脱下来,看能不能勉强凑够上样量。他现在要去跟红姐说下情况。

杨帆听後,心里一阵害怕,觉得今天大概率要倒大霉。她忍不住细细回忆起来,解释道,“今天本来样本就不多,不是很忙,我很清楚记得我明明是配对了试剂的啊。15ml管子配10ml 80%乙醇,先倒入8ml乙醇再加2ml无核酸酶水,混匀了就行啊,不会错啊。乙醇我今天还是用的新开封的,开封日期还是我写的啊。无核酸酶水也是我今天新分装的,和以前一样啊,没变化。”

组长听完,问道,“你是不是用15ml管子分装水,结果倒完酒精忘记哪个是水哪个是酒精了,所以有一管子乙醇配错了?你是不是又没有做好标记?不是交给过你麽,要麽管身和管盖都要写,加样前再确认下,加完样把管子放到另一个架子上防止自己记错?你做事太粗心了啊,之前还能说是加班太累不适应,上周你可是休息了的,怎麽这周第一天就能出这种错误?”

“组长,我没有啊,我记得我就是这麽做的啊。我还记得我配完试剂放到这个传递窗了,还跟徐寿祖打招呼说我放这儿了,你看,就是,咦?”杨帆看着一扇传递窗感到奇怪,打开传递窗,把一管15ml离心管取出来,“咦,徐寿祖你用的什麽80%乙醇?这个才是我配置的啊,我不是跟你说了在传递窗里面麽?你怎麽没拿?”

所有人看着杨帆手里面的管子,都有些不可置信。

徐寿祖急了,“啊,我就是从传递窗拿的啊?哎,不对,等会。上午没有血液样本,都是蜡块或者玻片,我去组织提取那个屋和陈平忙着处理,都已经消化上了。下午血液才到了,我就过来处理。我下午忘记早上让杨帆帮忙配试剂了,我想着下午还要用80%乙醇,陈平说他今天配了挺多的,我就分走了一些,从外面那个传递窗拿进来了。所以,我用的是陈平配置的?坏事了,陈平那边下午要洗脱回收了!”

徐寿祖和组长都急了,从杨帆和黄婷身边窜过去,跑到组织提取屋里面。杨帆和黄婷也赶紧赶过去,正好看到在定量仪器旁边一脸疑惑的陈平。

徐寿祖哀嚎到,“你不会也没浓度吧?”

陈平说到,“你怎麽知道的?今天好奇怪啊,组织都挺大的,怎麽浓度这麽低,我刚想找组长说呢。”

组长一脸丧气的让陈平把配置好的乙醇拿过来,闻了闻,生气的质问到,“你乙醇配错了!”

陈平不敢置信,一把拿过来,拉下口罩小心闻了闻,不敢置信的说到,“怎麽回事!我是配对了啊!坏事了,组长,今天试剂盒正好要开新的,我用这个配的新洗液,今天用的都是新的。怎麽办啊,组长?”

杨帆听到这,和黄婷对视一眼,发现对方都是满脸震惊的样子。

组长愤怒的拍着桌子,冲陈品喊道,“你有没有脑子!干了多久了!还能出这种低级错误!别废话了,重新提取,做不完不能下班!徐寿祖你也重新做,你们俩今天是做提取的,做不完你俩都别下班!今天用80%配置的试剂丢掉,开新的!”

组长转头看着杨帆和黄婷,愤怒的说,“看什麽看,还不回去干活?黄婷你快点,一会快递要下班了,杂交文库洗完质控了麽?杨帆,你赶快做,看浓度是不是正常。不行你今天也得给我加班重做!一天天的,就没有省心的时候,不是这个出错就那个出错,都觉得日子过的太好了是吧!”

莫名其妙被卷入其中,莫名其妙被说一顿,杨帆面上虽然不是很开心,但是心里暗自窃喜,还好不是自己出错。

但是杨帆心里也有些害怕,万一自己的乙醇也配错了呢,那岂不是又要重新做一遍建库,还得被批评?

抱着忐忑的心态,杨帆万分紧张的做完分选,就取出来2ul産物去做质控。

幸好,浓度都正常,産物片段分布也正常。杨帆本来想要把片段检测仪器收拾下,黄婷进来说她还要做质控,让杨帆先不要收拾。而且徐寿祖他们也要质控,不过今天可能来不及了,她去做上质控去问问要不要给他们留着仪器先不收拾,要是不需要,她一会做完就收拾下仪器。

杨帆听完,就没再管仪器,只是登记好使用人和日期,以及仪器正常後,就回去计算投入量要把样本杂交过夜了。

时间还不些早,杂交时间要在12~16小时之间,杨帆打算先把质控结果上传到系统,收拾下今天用到的屋子,再做杂交。

刚把建库屋子收拾完,杨帆突然感到手机在震动,红姐给她打电话,语气有些冲的问今天浓度是否都正常。杨帆回复说都正常後,红姐要求杨帆把质控结果丶计算的文库投入量发给她,她先看下结果,一会儿会让组长看着她做。

杨帆心里觉得有些别扭,感觉不被信任。可是转念一想,今天这麽惊险,有人看着也好,省的做错了又得被批评。

杨帆答应红姐的要求,把结果拍照发给红姐後,就猫在杂交室心不在焉的玩手机,静静的等待着组长来找她。

过了一会儿,就听到有人脚步重重的走来,杨帆赶紧收好手机推门查看,看到组长一脸烦躁的走来。

杨帆赶紧缩回实验室,等着组长过来。组长来了後,先跟杨帆说了下有几个文库存在小片段和拖尾,杨帆有些疑惑不解,以前的文库也会有这种情况,这个也难免,毕竟每个样本的提取质量有区别,同一批次同一个人做实验,有的样本就是会出现拖尾或者引物峰,有的就不会。

但是看到组长一脸不耐烦的样子,杨帆也不敢解释什麽,只是说看着质量都是可以杂交的,虽然有些小峰或者拖尾,但是以前的样本也有,不影响後续实验。

组长叹气说,“不要老想着实验能做出来,有産物就行,质量差了影响测序效率,生信那边会反馈结果给红姐的,红姐不好交代。”

杨帆疑惑的说,“可是这次结果真的还可以啊,小峰就一点点,拖尾也不多,後续实验纯化还是能洗掉一些的。而且,样本质量本身就有区别啊。”

组长不耐烦继续解释了,说到,“以後组织和组织样本杂交,血液游离dna自己杂交。组织和组织杂交时,福尔马林处理的样本投入量多一些,先按照组织1:1.5投入吧。如果血液总dna和组织杂交到一起,血液投入量减少到组织的1/5,所以你的投入量要重新计算一遍。”

杨帆听完直接懵掉了,最後组长给杨帆计算出来,说以後用新的投入量计算办法,他会整理好规则发到群里面,刚开始大家不熟悉的时候,每次做杂交的要把计算结果发群里,他检查无误後再实验,後面大家就要都掌握了。

杨帆听完,不着急理解,先赶快把实验做上,争取正常下班。

虽然心里好奇徐寿祖和陈平的情况,不过杨帆觉得今天受到的惊吓已经够了,她要赶快从实验室离开,免得自己成为出错的那个人。

作为一个犯过错被批评的人,杨帆很好奇这次组长和红姐会怎麽处理这次的事件,带着点看热闹的心态。杨帆意识到自己这种心态的瞬间,感觉自己有些过分了。作为同事,即使是私下里,也不应该以别人犯错而自己没犯错感到庆幸,甚至隐隐的有些开心和痛快。

杨帆心里对自己说,这样不对,你不应该这麽快就变成你最讨厌的那种大人,变成那种爱幸灾乐祸丶落井下石丶说风凉话的大人。毕竟别人并没有跟你有矛盾或者利益之争,今天发生的一切事情都是在排查问题,对方并没有故意的甩锅和栽赃陷害。杨帆,你不能一下子就把人想的太坏,事情并没有发生,不是麽?而且对方做的事情,一点点去想细节,其实并没有过分。设身处地的想,如果你是徐祖寿或者黄婷,你的表现也会和他们一样。不要总是恶意的要求别人做的完美无暇,而自己却对自己要求宽松。

小小的内心批判自己一番,杨帆心情稍微平静了下,带着有些负罪感的开心度过了一晚。

第二天一进入实验室,杨帆就自动的去做杂交後的清洗丶纯化和扩增了。

实验室的安排是轮转的,每个人都在提取丶建库杂交丶文库清洗送测,这几个步骤轮转。其他一些fish丶he染色或者qpcr之类的实验,都是由组长灵活安排。这样的好处,就是大家都不用抱怨工作分配不公平,也都能熟悉整个实验流程,都能做到独当一面,当然,也方便出问题後追责。

刚把试剂从冰箱拿出来室温平衡,杨帆就去试剂配置间配80%乙醇了。黄婷突然进入,看到杨帆顿了下,嘟囔着还是自己配试剂比较保险,就出去别的实验室做准备工作了。

配置完乙醇,杨帆正想回实验室做实验,就看到放片段检测仪的屋子里面,徐祖寿和陈平正惊慌的跟组长说着什麽。

看到杨帆在走廊走着,组长突然喊住杨帆,让杨帆过去。

杨帆心慌的走过去,组长有些着急的问,“昨天是你最後一个用仪器的麽?你昨天用的时候是正常的吧,用完之後你收拾了麽?”

杨帆迷茫的回到,“怎麽了麽?昨天我不是最後一个用的。我用的时候黄婷说她还要用,我用完了就没收拾。是怎麽了麽?”

徐祖寿插嘴问道,“你今天来的早,是不是把仪器打开提前准备着了?试剂盒也提前拿出来平衡着?”

杨帆更是一头雾水,“没啊,今天我做文库清洗,至少要下午才会用到检测仪器,所以我压根就没来这个屋子。反正提取和建库肯定是会比我先用这台仪器,我不用着急啊?”

组长让杨帆把黄婷叫来,杨帆去前台把正在整理样本信息单的黄婷叫到实验室。

组长也问了黄婷相同的问题,黄婷说她用完了想要清洗,突然想起来提取的样本今天还没做检测,去问了徐祖寿要不要给他们留着仪器先不收拾,徐祖寿说他们还要用,让黄婷不用管了,黄婷就走了。

徐祖寿这时候有些恍惚,和黄婷争执几句後,把话题抛给陈平,说他昨天在组织提取实验室收尾,让陈平去收拾实验室。陈平坚称徐祖寿没交代过要收拾片段检测仪器。

“昨天做的太晚了,咱俩不是说今天上午抽空把质控跑完麽?组长,昨天你也和我们加班到挺晚的,我们跟你说了,太晚了今天就不做了,明天早上我们补上,反正今天我们建库,样本不多,时间还算充裕,不着急,你也答应了。我们就没做检测啊。确实没人跟我说要收拾这个仪器啊。”陈平委屈的解释到。

组长看着两人在争执,皱眉解释说,“昨天我还有文件要写,要跟红姐讨论最近数据産出问题。我是陪着你们,看着你们把实验做完,浓度测完,我才走的。走之前我就跟你们说了,把实验室仪器收拾好再走,顺便检查下所有的屋子情况,後面你们怎麽收拾的我就不知道了。”

“不管怎麽样,看来这台仪器开了一晚上,试剂也在外面放了一晚上。还好这个试剂盒用的差不多了,还能在做50来个样本,你们先凑活着用下,应该问题不大,之前试剂过期了,峰还是看起来比较正常的。这个试剂盒没那麽娇贵,先用着,别耽误样本周期。我去查下库存,也催下上次提交的采购单。我记得之前是有一个新的到货了的,应该问题不大。”

组长双手抱胸,举起一只手托着腮,眼神涣散的接着说,“各位,我真的求求各位了,不要再犯错了,最近太密集了,我都不敢跟红姐说了。这个事情就先这样吧,昨天刚给红姐说了问题,今天我是真的有点害怕再接着汇报错误了。”

“行行好,我也是打工的,别再给我搞事情了。我难受,你们也难受,领导也难受,何必呢。这个事情,我今天找时间会小心跟红姐说一声的。我感觉大家前段时间加班太狠了,我也会和红姐沟通个办法的。你们保证接下来别再出问题了,真的是,没法评价。要不就是以後出了问题,你们就不要让我知道,自己悄悄解决,我是真的不想再汇报这些破事了。”

组长眼神发狠的看了一眼每个人的眼睛,最後强调了下不要再出错误了,安排好每个人的工作,就离开了实验室。

虽然杨帆自己没犯错,但是心里也十分害怕。安慰好自己後,杨帆默默的走回实验室做实验。

还好,今天大家一切正常,都有结果。

中午吃饭的时候,杨帆发现陈平和徐祖寿被组长叫到红姐办公室,她心里情绪有些复杂,既不是高兴,也不是庆幸。嗯,怎麽形容呢,可能就是菜市场笼子里面的鸡,看到有同类被大手抓走,就在旁边被割喉放血,热水拔毛的感觉,好像没什麽事情发生,又好像什麽都发生了。

吃饭的时候,吴芳也有些八卦的想要了解情况,杨帆觉得不好把自己本部门其他同事的错误当作八卦说出去,毕竟组长和红姐的态度在那里摆着,她只说自己什麽都不知道,就糊弄过去了。

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